Печать

ПРОБОПОДГОТОВКА Страница №43

. Пробоподготовка в экологическом анализе (Другов Ю.С.,Родин А.А.)

2. Абсорбционное улавливание загрязнений воздуха 43 2.5.2. Тонкослойная хроматография

Прием дериватизации очень часто используют и в ТСХ [72-77]. В этом случае химические реакции проводят (см. также главу II) непосредственно на пластинке для ТСХ, переводя целевые компоненты, нанесенные в растворе на пластинку, в соответствующие производные, которые можно легко обнаружить (проявить) и детектировать, например с помощью фотометра или денситометра, УФ-спектро-фотометра или масс-спектрометра [1, 72, 76, 79].

Для подготовки пробы при проведении ТСХ-анализа, включающей извлечение анализируемых компонентов из исследуемого объекта, находят применение двухфазные слои, которые в виде готовых пластинок поставляются различными фирмами. Анализируемые растворы наносят на слой предварительного концентрирования, а сам хроматографический процесс проходит на основном слое. При этом необходимо обеспечить такие условия, чтобы мешающие компоненты не определялись наряду с анализируемыми веществами. Для этого проводят предварительную (первичную) очистку пробы (дистилляцию, экстракцию, сублимацию, осаждение), включающую различные приемы концентрирования. Следует отметить, что требования к очистке образца в тонкослойной хроматографии менее жесткие, чем в других хроматографических методах. Полученный образец содержит меньшее число компонентов, но в процессе концентрирования вследствие близких физико-химических характеристик вместе с интересующими исследователя соединениями могут содержаться и посторонние вещества [76].

Конечными процедурами очистки и подготовки пробы являются обычно электрофорез и (или) хроматографическое разделение. Если матрица липофильная, адсорбционная очистка может быть проведена на силикагеле, оксиде алюминия, флорисиле, полиамидном сорбенте. Липофильную матрицу элюируют неполярным растворителем, при этом анализируемое вещество удерживается в концентрированной форме на колонке и элюируется позднее. Если далее необходимо провести фракционирование, то элюенты используют в соответствии с элюотроп-ными рядами, проводя таким образом групповое разделение. Если матрица гидрофильная, все липофильные компоненты, присутствующие в водной матрице, поглощаются липофильной фазой. Для селективной очистки разработаны фазы, обладающие наряду с липофильными и ионообменными свойствами. Такие сорбенты известны под названием polysphere RP-18CAT [77].

Широко используют в ТСХ пред- и пост-дериватизацию исследуемых соединений. Обычно целью дериватизации в ТСХ является повышение чувствительности анализа при введении хромофоров или флуорофоров в молекулы исследуемых соединений. Это может быть достигнуто как пост-, так и пред-хроматогра-фическими методами. Пред-хроматографическая дериватизация может также повышать специфичность разделения компонентов смеси, например, за счет изменения хроматографического поведения близких по химической структуре или хроматографическим свойствам соединений. Дериватизация может также увеличить стабильность (например, к окислению или разложению), понизить адсорбционную активность, улучшить растворимость или другие свойства анализируемых веществ. Однако это дополнительная стадия в хроматографическом процессе, которая может быть достаточно трудоемкой и длительной [74].

filesmonster.club Яндекс.Метрика